AProof® Corona Impfstatus Test (SARS-CoV-2 S-IgG ELISA)

Klinische Bedeutung SARS-CoV-2

Das Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) gehört zur Familie der Coronaviren und wird wie SARS-CoV-1 in die Gattung Betacoronavirus eingeordnet. Das neuartige Virus löste erstmals Ende 2019 eine Infektionswelle aus, die sich zunächst im Januar 2020 in der Volksrepublik China zur Epidemie und anschließend weltweit sehr schnell zur COVID-19-Pandemie ausgebreitet hat.

Die Übertragung von SARS-CoV-2 erfolgt hauptsächlich durch Tröpfchen beim Husten oder Niesen und bei engem Kontakt mit Infizierten. Insbesondere in geschlossenen, schlecht belüfteten Räumen ist auch eine Übertragung durch Aerosole möglich. Die Inkubationszeit beträgt 5-6 Tage; zwischen Ansteckung und dem Auftreten erster Symptome können aber auch bis zu 14 Tage vergehen (WHO, 24.2.2020).

Auch asymptomatische Infizierte können potenzielle Überträger des Coronavirus sein. Bei einem leichten Krankheitsverlauf klingen die Symptome in der Regel innerhalb von 2 Wochen ab. Verläuft die Erkrankung schwerer, dauert die Rekonvaleszenz 3-6 Wochen. Bei rund 81% der registrierten Infektionen ist ein leichter Krankheitsverlauf mit Fieber und einer leichten Lungenentzündung zu beobachten; bei etwa 14% der Fälle ist der Verlauf schwerer und in etwa 5% der Fälle so schwer, dass eine intensivstationäre Behandlung der Patienten erfolgen muss. (Zunyou, W. et al., 2020).

Seit Ende 2020 gibt es diverse Impfstoffe gegen COVID-19, die eine Antikörper-Bildung gegen das S-Protein des SARS-CoV-2-Virus bewirken.

Diagnostik

Impf-Antikörper werden in der Regel 14-21 Tage nach der ersten Impfung gebildet und sind 7 Tage nach der zweiten Impfung sicher nachweisbar. Bei Impfstoffen mit nur einer Impfung (z.B. Johnson&Johnson), sind die Antikörper nach 21 Tagen nachweisbar.

Natürliche Antikörper werden in der Regel 10-14 Tage nach einer Infektion gebildet und sind ab diesem Zeitpunkt für mindestens 8 Monate^* sicher nachweisbar.

Für die Diagnostik akuter SARS-CoV-2-Infektionen ist der Direktnachweis des Virus mittels Antigen-Schnelltests oder RT-qPCR geeignet. Letzteres basiert auf der Detektion von zwei Nukleotidsequenzen (E- und RdRp-Gen) die in erster Linie aus Probenmaterialien der oberen Atemwege (nasopharyngeale und oropharyngeale Abstriche) und der unteren Atemwege (bronchoalveoläre Lavage, Trachealsekret, Sputum, u.a.) vervielfältigt werden. Dieser Test ermöglicht selbst bei subklinischen oder asymptomatischen Verläufen einen Erregernachweis mit einem Median von 5 Tagen nach dem Viruskontakt bis zu ca. 14 Tagen nach dem Einsetzen der Symptome (Ai, T. et al., 2020).

*laut Wissensstand vom Januar 2021

Zweckbestimmung

Der SARS-CoV-2 S-IgG ELISA ist für den quantitativen Nachweis spezifischer IgG-Antikörper gegen das SARS-CoV-2-Virus, die nach einer Impfung gebildet werden, bestimmt. Der Test unterstützt somit die Kontrolle des Impftiters und das Ergebnis wird in BAU/ml (Binding Antibody Units pro Milliliter angegeben und gleichzeitig als positiv (>44 BAU/ml), grenzwertig (22-44 BAU/ml) oder negativ (<22 BAU/ml) tituliert.

Testprinzip

Das Testprinzip beruht auf der Bindung von SARS-CoV-2-spezifischen Antikörpern an das auf der Mikrotiterplatte immobilisierte rekombinant exprimierte S-Protein. Nicht-gebundene Antikörper werden nach diesem ersten Schritt durch Waschen entfernt. Während der zweiten Inkubationsphase binden enzymmarkierte Sekundärantikörper, welche gegen humane Antikörper der IgG-Klasse gerichtet sind, an den Antigen-Antikörperkomplex. Nicht-gebundene Sekundärantikörper werden erneut durch Waschen entfernt. Zur Detektion wird eine farblose Substratlösung zugegeben, welches durch das Enzym des Sekundärantikörpers zu einem blauen Farbstoff umgewandelt. Im letzten Schritt wird die Reaktion abgestoppt, es erfolgt gleichzeitig ein Farbumschlag von blau zu gelb. Die Absorption der Lösung wird gemessen und korreliert mit den initial gebundenen Antikörpern gegen das Antigen.